Description
Выращивание эмбрионов. Процесс развития и наблюдения за оплодотворенными яйцами (зиготами) в искусственно созданных условиях вне женского организма. Культура эмбрионов занимает 2-5 дней, после чего их переносят в матку для дальнейшего развития. Время культивирования эмбрионов отсчитывается от дней после пункции и оплодотворения, поскольку с тех пор у большинства ооцитов появляются первые признаки оплодотворения. Основной тенденцией в эмбриологии является длительное культивирование эмбрионов, пока стадия бластоцисты не достигнет 5-го дня, что открывает большие возможности для имплантации.
Выращивание эмбрионов проводят в специальных сO2-инкубаторах - в шкафах с постоянной температурой - 37 ° с, содержание сO2 - от 5 до 6%, влажность - 99%. Эмбрионы помещают в инкубаторы в лабораторную стеклянную посуду с маркировкой (чашки Петри, банки Нунки ) На питательной среде (питательные вещества). Питательная среда, используемая современной гинекологией для культивирования эмбрионов, обогащена основными физиологическими ионами калия, магния, натрия, хлора, кальция, аминокислотами, энергетическими субстратами (глюкоза, пируват, лактат), витаминами и сывороточными белками.
В течение периода культивирования размер зародыша остается практически неизменным: в первый день он составляет 0,1 на пятый день - около 0,2 Однако в настоящее время наблюдается множественная фрагментация его клеток (бластомеров): от 1 клетки в первый день до 40-200 клеток на пятый день культивирования.
Первая оценка эмбрионов происходит через 16-18 часов после оплодотворения, через секунду после другого дня. Оценка зародышей и их перенос в новую культуральную среду проводится ежедневно. Качество эмбрионов оценивается на основе их микроскопического изображения и скорости деления. Функционально и морфологически нормальные эмбрионы делятся относительно быстро и через два дня после искусственного осеменения состоят из 2-4 бластомеров примерно одинакового размера с прозрачной цитоплазмой без признаков фрагментации клеток.
Если на этапе культивирования эмбриона существует риск наследственных генетических или связанных с полом заболеваний, то перед имплантацией в матку перед имплантацией проводится генетическая диагностика. В этом случае оценивается набор хромосом эмбриона, и эмбрионы со здоровым генотипом или необходимым полом отбираются для трансплантации. Предимплантационная диагностика проводится с помощью анализа FISH (флуоресцентной гибридизации), ПЦР-диагностики или биопсии 1-2 бластомеров на стадии эмбрионального развития в 6-8 клетках. Статистика наличия хромосомных аберраций у эмбрионов, оплодотворенных in vitro и, естественно, одинакова.
Часть жизнеспособных зародышей может быть подвергнута криоконсервации - заморозке и хранению при крайне низких температурах жидкого азота. При необходимости, после оттаивания, эти эмбрионы можно использовать для переноса обратно в матку.
В процессе культивирования эмбрионов некоторые из них могут не развиваться или развиваться ненормально - такие эмбрионы не могут быть перенесены в матку. Время переноса эмбрионов производится после оценки их количественных и качественных характеристик.
Выращивание эмбрионов проводят в специальных сO2-инкубаторах - в шкафах с постоянной температурой - 37 ° с, содержание сO2 - от 5 до 6%, влажность - 99%. Эмбрионы помещают в инкубаторы в лабораторную стеклянную посуду с маркировкой (чашки Петри, банки Нунки ) На питательной среде (питательные вещества). Питательная среда, используемая современной гинекологией для культивирования эмбрионов, обогащена основными физиологическими ионами калия, магния, натрия, хлора, кальция, аминокислотами, энергетическими субстратами (глюкоза, пируват, лактат), витаминами и сывороточными белками.
В течение периода культивирования размер зародыша остается практически неизменным: в первый день он составляет 0,1 на пятый день - около 0,2 Однако в настоящее время наблюдается множественная фрагментация его клеток (бластомеров): от 1 клетки в первый день до 40-200 клеток на пятый день культивирования.
Первая оценка эмбрионов происходит через 16-18 часов после оплодотворения, через секунду после другого дня. Оценка зародышей и их перенос в новую культуральную среду проводится ежедневно. Качество эмбрионов оценивается на основе их микроскопического изображения и скорости деления. Функционально и морфологически нормальные эмбрионы делятся относительно быстро и через два дня после искусственного осеменения состоят из 2-4 бластомеров примерно одинакового размера с прозрачной цитоплазмой без признаков фрагментации клеток.
Если на этапе культивирования эмбриона существует риск наследственных генетических или связанных с полом заболеваний, то перед имплантацией в матку перед имплантацией проводится генетическая диагностика. В этом случае оценивается набор хромосом эмбриона, и эмбрионы со здоровым генотипом или необходимым полом отбираются для трансплантации. Предимплантационная диагностика проводится с помощью анализа FISH (флуоресцентной гибридизации), ПЦР-диагностики или биопсии 1-2 бластомеров на стадии эмбрионального развития в 6-8 клетках. Статистика наличия хромосомных аберраций у эмбрионов, оплодотворенных in vitro и, естественно, одинакова.
Часть жизнеспособных зародышей может быть подвергнута криоконсервации - заморозке и хранению при крайне низких температурах жидкого азота. При необходимости, после оттаивания, эти эмбрионы можно использовать для переноса обратно в матку.
В процессе культивирования эмбрионов некоторые из них могут не развиваться или развиваться ненормально - такие эмбрионы не могут быть перенесены в матку. Время переноса эмбрионов производится после оценки их количественных и качественных характеристик.
Item codes
|