Другие названия и синонимы
Analysis of CALR gene mutations, deletions, insertions, PCR, qualitative.Оценка результатов
Формат выдачи результата: Качественный с указанием типа мутации в случае выявления.
Отрицательный результат:
CALR (мутации 9 экзона) не обнаружены.
Положительный результат:
CALR (мутации 9 экзона) обнаружена (тип 2).
Отрицательный результат:
CALR (мутации 9 экзона) не обнаружены.
Положительный результат:
CALR (мутации 9 экзона) обнаружена (тип 2).
Описание
Метод определения Полимеразная цепная реакция (ПЦР), прямое секвенирование по Сэнгеру.
Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА).
Мутации в гене кальретикулина сALR (расположен на р плече 19-й хромосомы) являются маркером миелопролиферативных новообразований (МПН) - заболеваний крови, сопровождаемых образованием избыточного количества зрелых миелоидных клеток. Частота обнаружения данных мутаций при эссенциальной тромбоцитемии составляет порядка 20% случаев, при первичном миелофиброзе - 25% случаев. Для истинной полицитемии дефекты гена сALR не характерны.
Патогенез сALR-позитивных МПН до конца не изучен. Ведущей является гипотеза, согласно которой мутантный белок сALR взаимодействует с рецептором тромбопоэтина и индуцирует его структурные изменения, достаточные для активации янус киназы JAK2, задействованной в процессах передачи сигнала для выживания и пролиферации гемопоэтических клеток. Этот процесс оказывается возможным благодаря смене отрицательного заряда С-домена белка сALR на положительный в результате делеций и инсерций в 9-м экзоне гена сALR, приводящих к сдвигу рамки считывания и изменению С-концевой последовательности полипептида. Структурно белок сALR представлен тремя доменами: N, P и С. N-домен способен связываться с рецептором тромбопоэтина. В неизмененном белке этому противодействует домен Р. Мутантный С-конец блокирует Р-домен, освобождая N-домен и делая возможным его конкурентное связывание с рецептором. Таким образом, активация путей передачи сигнала в клетке осуществляется независимо от уровня тромбопоэтина.
Дефекты гена сALR подразделяют на мутации типа 1 и им подобные (делеции - потери части нуклеотидной последовательности) и мутации типа 2 и им подобные (инсерции - вставки). Наиболее распространенными являются L367fsX46 (делеция 52 пар оснований) и K385fsX47 (инсерция 5 пар оснований) - на их долю приходится более 80% всех обнаруживаемых в гене сALR мутаций.
Мутации в гене сALR ассоциированы с молодым возрастом пациентов, высоким уровнем тромбоцитов, благоприятным прогнозом течения МПН. При первичном миелофиброзе наиболее длительная выживаемость отмечена у сALR-положительных пациентов с мутациями типа 2. При эссенциальной тромбоцитемии значимых различий в выживаемости больных с мутациями типа 1 и 2 не выявлено.
Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА).
Мутации в гене кальретикулина сALR (расположен на р плече 19-й хромосомы) являются маркером миелопролиферативных новообразований (МПН) - заболеваний крови, сопровождаемых образованием избыточного количества зрелых миелоидных клеток. Частота обнаружения данных мутаций при эссенциальной тромбоцитемии составляет порядка 20% случаев, при первичном миелофиброзе - 25% случаев. Для истинной полицитемии дефекты гена сALR не характерны.
Патогенез сALR-позитивных МПН до конца не изучен. Ведущей является гипотеза, согласно которой мутантный белок сALR взаимодействует с рецептором тромбопоэтина и индуцирует его структурные изменения, достаточные для активации янус киназы JAK2, задействованной в процессах передачи сигнала для выживания и пролиферации гемопоэтических клеток. Этот процесс оказывается возможным благодаря смене отрицательного заряда С-домена белка сALR на положительный в результате делеций и инсерций в 9-м экзоне гена сALR, приводящих к сдвигу рамки считывания и изменению С-концевой последовательности полипептида. Структурно белок сALR представлен тремя доменами: N, P и С. N-домен способен связываться с рецептором тромбопоэтина. В неизмененном белке этому противодействует домен Р. Мутантный С-конец блокирует Р-домен, освобождая N-домен и делая возможным его конкурентное связывание с рецептором. Таким образом, активация путей передачи сигнала в клетке осуществляется независимо от уровня тромбопоэтина.
Дефекты гена сALR подразделяют на мутации типа 1 и им подобные (делеции - потери части нуклеотидной последовательности) и мутации типа 2 и им подобные (инсерции - вставки). Наиболее распространенными являются L367fsX46 (делеция 52 пар оснований) и K385fsX47 (инсерция 5 пар оснований) - на их долю приходится более 80% всех обнаруживаемых в гене сALR мутаций.
Мутации в гене сALR ассоциированы с молодым возрастом пациентов, высоким уровнем тромбоцитов, благоприятным прогнозом течения МПН. При первичном миелофиброзе наиболее длительная выживаемость отмечена у сALR-положительных пациентов с мутациями типа 2. При эссенциальной тромбоцитемии значимых различий в выживаемости больных с мутациями типа 1 и 2 не выявлено.
Список литературы
• Абдулкадыров М., Шуваев В.А., Мартынкевич И.С. Миелопролиферативные новообразования. М. Изд. Литтерра». 2016:304.
• Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитопения, первичный миелофиброз). Российское Национальное гематологическое общество. 2018. https://npngo.ru/uploads/media_document/286/7aa0933a-3a78-4648-908c-2c413aad066a.pdf.
• Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloidneoplasms and acute leukemia. вlood. 2016;127(20):2391-2405.
• Nangalia J. Somatic сALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2. The New England journal of medicine. 2013;369(25):2391-2405.
• Tefferi A., Wassie E.A., Guglielmelli P. et al. Type 1 vs Type 2 calreticulin mutations in essential thrombocythemia: a collaborative study of 1027 patients. American journal of hematology. 2014;89(8):121-124.
• Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитопения, первичный миелофиброз). Российское Национальное гематологическое общество. 2018. https://npngo.ru/uploads/media_document/286/7aa0933a-3a78-4648-908c-2c413aad066a.pdf.
• Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloidneoplasms and acute leukemia. вlood. 2016;127(20):2391-2405.
• Nangalia J. Somatic сALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2. The New England journal of medicine. 2013;369(25):2391-2405.
• Tefferi A., Wassie E.A., Guglielmelli P. et al. Type 1 vs Type 2 calreticulin mutations in essential thrombocythemia: a collaborative study of 1027 patients. American journal of hematology. 2014;89(8):121-124.
Подготовка
Специальной подготовки не требуется.
Показания к применению
Постановка и подтверждение диагноза хронического миелопролиферативного новообразования.
Источник: Invitro.
Источник: Invitro.